Nöron diferenciasyonu için kök hücre tarifinde geri çekim fazı patlıyor, kalite kontrolü için ne yapıyorsunuz?

Taner Fırat · 2026-10-21T13:27:04+00:00

Hocalarım selam, laboratuvarda multipotent kök hücrelerden nörojeniz denemeleri yürütüyorum ama geri çekim (withdrawal) aşamasında hep takılıyorum. İnduktyon koktelini kesince hücrelerin çoğu olgunlaşamadan düşüyor, bir kısmı da geri düştüğü için kafam çok karışık. Teratoma riski taşıyan pluripotent kalmış hücrelerden nasıl arınıyorsunuz? Hangi markerları takip ediyorsunuz, fonksiyonel olgunlaşma için ne önerirsiniz? Deneyip başaran var mı, zorluklarınızı merak ediyorum.

Bu konu 1 yanıt içerir, 2 izleyen vardır ve en son 5 gün 11 saat önce Sibel Özmen tarafından güncellenmiştir.

2 yazı görüntüleniyor - 1 ile 2 arası (toplam 2)

Yazar

Yazılar
Ekim 21, 2026: 1:27 pm #9290

Taner Fırat
Üye

Hocalarım selam, laboratuvarda multipotent kök hücrelerden nörojeniz denemeleri yürütüyorum ama geri çekim (withdrawal) aşamasında hep takılıyorum. İnduktyon koktelini kesince hücrelerin çoğu olgunlaşamadan düşüyor, bir kısmı da geri düştüğü için kafam çok karışık. Teratoma riski taşıyan pluripotent kalmış hücrelerden nasıl arınıyorsunuz? Hangi markerları takip ediyorsunuz, fonksiyonel olgunlaşma için ne önerirsiniz? Deneyip başaran var mı, zorluklarınızı merak ediyorum.

"Günlük Temel Rutin:"

"– Hareket: 8.000 Adım"

"– Hidrasyon: 3.0 Litre Su"

"– Dinlenme: Sirkadiyen Ritim Uyumu"

"– Beslenme: Soğuk Duş & Nefes Egzersizi"

Ekim 22, 2026: 6:24 am #9425

Sibel Özmen
Üye

Hocam selamlar, tam benim alanım bu, yıllardır aynı dertten yakınıyorum aslında, ikinizi de güzelce anlayabiliyorum. Önce mekanizmayı netleştireyim: İnduktyon koktainini (retinoik asit, Wnt/SHH modülatorleri, BDNF/GDNF gibi faktörler) keserken asıl amaç hücrenin epigenetik programını gerçekten ‘kilitlemek’. Ani ve tek seferlik kesim yerine kademeli azaltma (step-down) çoğu zaman çok daha stabil sonuç veriyor, çünkü ani ortam değişimine hücreler stresle tepki verip apoptoza giriyor veya geri düştüğü pluripotent programa geri dönüyor.

Kalite kontrolü için takipte olduğum markerlar şunlar:
– Nöron olgunlaşma: βIII-tubulin (Tuj1), MAP2, NeuN, synaptophysin
– Pluripotent/kontaminasyon: Oct4, Nanog, SOX2 NEGATİFLİĞi – bunlar hala çıkıyorsa teratoma riski devam ediyor demektir
– En kritik nokta: en az 14-21 gün kültür sonra functional maturation için patch-clamp veya calcium imaging ile gerçek işlev görmek

Pratik bir ipucu da vereyim: diferansiyasyonun 3. haftasında flow sitometry ile pluripotent markordan negatif popülasyonu ayırıp replantasyon yapmak saflığı ciddi biçimde artırıyor. Bir de karyotip stabilitesini mutlaka kontrol edin, uzun kültürlerde aneuploidi maalesef sık görünüyor. Umarım işinizi görür, başarılar hocam!

"Günlük Temel Rutin:"

"– Hareket: 10.000 Adım"

"– Hidrasyon: 3.0 Litre Su"

"– Dinlenme: 8 Saat Kaliteli Uyku"

"– Beslenme: Soğuk Duş & Nefes Egzersizi"
Yazar

Yazılar

2 yazı görüntüleniyor - 1 ile 2 arası (toplam 2)

Bu konuyu yanıtlamak için giriş yapmış olmalısınız.